Начини за избягване на клетъчно замърсяване: Съвети за пипетиране, които трябва да знаете
Сред многото променливи, които се контролират в клетъчната култура, една специфична променлива засяга целия експеримент: замърсяването. Един фактор, допринасящ за клетъчното замърсяване, не винаги е на радара и въпреки че може тихо да повлияе на здравето на клетките и да повлияе на данните от измерванията, това е пипетиращото замърсяване.
Изборът на пипети, накрайници за пипети и програми за пипетиране получава малко внимание при проектирането на експерименти. Дори общият разтвор (автоклавиране) за избягване на замърсяване с пипета може да не е толкова ефективен, колкото обикновено се смята.
Първото правило на клетъчната култура: избягвайте замърсяване. Защо стерилната техника е толкова важна за успешната клетъчна култура?
Асептичната техника е единственият начин за получаване на надеждни и възпроизводими резултати. Замърсяването може да засегне клетъчния растеж, метаболизма и здравето -- нещо, което учените се интересуват от изучаване. Замърсените клетъчни линии нямат желаните свойства и функционират по различен начин всеки път, в зависимост от тежестта на замърсяването. Освен това, ако замърсителите надраснат клетките, които ви интересуват, може да се окажете, че изучавате грешния организъм.
Какви видове замърсители често срещат учените?
Често срещани източници на замърсяване са бактериите, дрождите и плесените. При работата с клетъчни култури най-трудната за откриване и унищожаване е микоплазмата. По-рядко срещаните видове замърсяване включват, например, пластмасови излугвания в лабораторни консумативи.
Какви са често срещаните причини за клетъчно замърсяване?
Често срещан източник на замърсяване е лошото пипетиране, като например използването на замърсени пипети и накрайници без филтър. Освен това липсата на добри лабораторни практики, като например неадекватно обеззаразяване на инструменти като инкубатори или шкафове с ламинарен поток, също е проблем. За отстраняване на микоплазмата е необходимо филтриране с използване на филтър 0.1 µm вместо филтър с 0.2 µm.
Три пипетиращи замърсявания:
1. Замърсяване от пипета към проба: Пипетата или върхът на пипетата замърсяват пробата.
Как да избегнем:
Използвайте стерилни филтърни накрайници, за да предотвратите замърсяване на тялото на пипетата.
Сменяйте върха на пипетата след всяка проба.
Автоклавирайте или стерилизирайте пипетите редовно с етанол. Изберете пипета, съвместима с автоклав.
2. Замърсяване от пробата към пипетата: Пипетирането на пробата в тялото на пипетата замърсява пипетата.
Как да избегнем:
Използвайте филтърни накрайници или накрайници с положително изместване, за да предотвратите навлизането на проби в тялото на пипетата.
Когато пипетирате, дръжте пипетата във вертикално положение. Съхранявайте пипетата изправена.
Наклонете бутилката при пипетиране.
Освободете бутона бавно, за да избегнете пръскане на пробата в пипетата. Изберете пипета, оборудвана с функция за меко изваждане.
3. Замърсяване между пробите: Остатъчните проби от пипетиране се прехвърлят към следващата проба. Обикновено се случва, когато един и същ накрайник се използва няколко пъти.
Как да избегнем:
Сменяйте върха на пипетата след всяка проба.
Използвайте филтърни накрайници или накрайници с положително изместване, за да предотвратите навлизането на пробата в тялото на пипетата и към следващата проба.
Уверете се, че върхът на пипетата е запечатан върху пипетата, за да избегнете изтичане на пробата. Например върхът на Yongyue Medical.
Има ли фактори на замърсяване, за които учените може дори да не знаят?
Ефективността на автоклавирането често не се проверява и ако автоклавът не работи правилно, върховете на автоклавираните пипети може да не са стерилни. Предварително стерилизираните филтри, опаковани в защитна опаковка, са най-безопасният вариант за предотвратяване на подобни инциденти. Процесът на предварителна стерилизация за висококачествени накрайници за пипети се валидира редовно, за да се гарантира ефективността на предварителната стерилизация.
Как инструментите за пипетиране и дозиране улесняват учените да боравят с проби в стерилна среда?
Изборът на правилните пипети и накрайници за пипети може да улесни асептичния работен процес. Медицинските пипети Yongyue са лесни за почистване и отваряне без инструменти, което ускорява ежедневното почистване. Тъй като автоклавирането е по-ефективно за премахване на замърсяване от кърпичките с етанол, механичните пипети на Sartorius са напълно автоклавируеми, което означава, че можете да обеззаразите вашите пипети надеждно. Изхвърлянето на мекия връх предотвратява потенциалния риск от замърсяване от пръски при изхвърляне на върха. Предварително стерилизираните филтърни накрайници предпазват вашите проби от кръстосано замърсяване. Медицинските накрайници Yongyue също са опаковани в непропусклива опаковка, което означава, че всяко замърсяване при условията на съхранение и доставка няма да влезе в контакт с накрайниците или кутията за накрайници.
Как учените могат да избегнат замърсяването? Какви са вашите най-добри съвети за стерилна работа?
Първо, добра лабораторна практика и внимателно планиране на работните стъпки. Уверете се, че сте запазили само това, което е необходимо за конкретен работен процес в шкафа с ламинарен поток и използвайте една клетъчна култура едновременно. Освен това редовното тестване за замърсители като микоплазма ви дава спокойствие и увереност в резултатите ви. Когато работите при стерилни условия, парите, похарчени за предварително стерилизирани филтърни накрайници и стерилни реактиви, си заслужават парите.
