За заболявания, причинени от вирусни инфекции, за да се изяснят видовете вируси, които трябва да се лекуват, могат да се извършат следните два вида проверки:
1. Директно откриване на самия вирус
2. Може да открие антигена на повърхността на вируса и нуклеиновата киселина на вируса.
Тестът идентифицира антителата, произведени, за да устоят на вируса:
При нормални обстоятелства изследването на антиген не изисква високи лабораторни условия и е подходящо главно за мащабен скрининг в първичните болници; тестването на антитела е лесно за работа и резултатите от теста могат да бъдат получени за 10-15 минути. Откриването на нуклеинова киселина изисква много лабораторни условия, периодичен персонал и оборудване, но страницата с резултатите е най-чувствителната и точна.
От 10-те нови реагента за откриване на нуклеинови киселини на коронавирус, които са одобрени, 8 от тях използват флуоресцентния PCR метод, а останалите методи за откриване са комбинираният метод за секвениране на полимеризация, закотвен с сонда, и метод на чип за амплификация с постоянна температура.
1. Флуоресцентен PCR метод
PCR методът се отнася до полимеразната верижна реакция, която може значително да увеличи следите от ДНК. Когато се използва за откриване на новия коронавирус, тъй като новият коронавирус е РНК вирус, е необходимо обратното транскрибиране на вирусната РНК в ДНК, преди да се извърши PCR откриване.
Принципът на флуоресцентното PCR откриване е, че докато PCR протича, реакционните продукти продължават да се натрупват, а интензитетът на флуоресцентния сигнал също се увеличава пропорционално. Накрая, промяната в количеството на продукта се следи от промяната в интензитета на флуоресценцията, като по този начин се получава крива на усилване на флуоресценцията.
В момента това е най-често използваният метод за откриване на нуклеинова киселина на новия коронавирус. Въпреки това, следните фактори могат да причинят грешки в резултатите от теста:
Неправилно съхранение или непредставяне за тестване: РНК вирусите лесно се разграждат. Следователно, след получаване на проби от пациенти, те трябва да бъдат съхранявани по стандартизиран начин и тествани възможно най-скоро. В противен случай резултатът от теста е вероятно да бъде неточен.
Интерпретация на грешки на резултатите: Одобрените понастоящем тестови продукти са избрани въз основа на отворената рамка за четене 1a/b, протеина на обвивката и нуклеокапсидния протеин на новия геном на коронавирус. Въпреки това, праймерите за откриване и дизайните на сондата на различните продукти са различни и има разлики в откриването и интерпретацията на сегменти с една цел, сегменти с двойна цел и сегменти с три мишени. Следователно, ако тълкуването не се извършва стриктно в съответствие с различните инструкции, това може да доведе до погрешна преценка за резултата.
2. Метод за секвениране на комбинирана проба-закотвена полимеризация
Това откриване е главно да се използва специален инструмент за откриване на генната последователност, носена от ДНК наносферите върху слайда за секвениране.
Този вид откриване има висока чувствителност и не е лесно да се пропусне диагнозата, но резултатите също се влияят лесно от много фактори, включително:
Проби, които не са тествани навреме: Подобно на флуоресцентния PCR метод, резултатите могат да бъдат неточни, ако не се съхраняват по стандартизиран начин и не се тестват възможно най-скоро.
Стайната температура на тестовата площадка е твърде висока: Това също ще повлияе на точността на резултатите от теста. Различни тестови инструменти и комплекти също могат да повлияят на резултатите.
3. Чип метод за усилване с постоянна температура
Откриването на генен чип е един от традиционните вирусологични методи за диагностика. Принципът на откриване е метод за откриване, разработен на базата на допълнителните характеристики на свързване на нуклеиновите киселини, който може да се използва за качествено или количествено измерване на нуклеиновите киселини, присъстващи в организмите. В сравнение с PCR, генният чип има по-висока степен на точност и по-кратко време, но също така е по-скъп и пропускателната способност на откриване (количеството данни, което може да се генерира за единица време) е относително по-ниско.
Термостатният чип, одобрен този път, може да открие шест вида респираторни вируси, включително новия коронавирус. Резултатите могат да бъдат получени в рамките на 1,5 часа,
В сравнение с PCR, генният чип има по-висока степен на точност и по-кратко време, но цената е по-скъпа, а пропускателната способност на откриване (количеството данни, което може да се генерира за единица време) е сравнително по-ниска.
4. Откриване на вирусни антитела
Реагентите за откриване на антитела се използват за откриване на IgM или IgG антитела, произведени от човешкото тяло, след като вирусът навлезе в човешкото тяло. IgM антителата се появяват по-рано, а IgG антителата се появяват по-късно.
Понастоящем петте нови реагента за откриване на коронавирусни антитела, които са одобрени, използват метода на колоидно злато и метода на хемилуминесценция на магнитни частици.
5. Метод на колоидно злато
Методът на колоидно злато използва тестова хартия за колоидно злато за тестване, която е хартията за бърз тест, често споменавана в момента.
Този вид тестова хартия е специално маркирана и има дупки върху нея, която се използва за накапване на серумната проба на изпитвания. Има две линии на тестовата хартия за колоидно злато, едната се нарича тестова линия, а другата се нарича линия за контрол на качеството. Ако и двете линии са оцветени, това означава положително; само линията за контрол на качеството е оцветена, което означава отрицателно; с изключение на тези два случая, той принадлежи към Невалиден резултат.