Клетъчното оформяне включва стъпките на клетъчно инжектиране, оформяне и получаване. Клетките в колбата за клетъчна култура трябва да растат и да се развиват до определена степен. В този момент е необходимо да се разчита на трипсин, за да се усвоят клетките на външната стена на колбата и след това да се усети. При ензимите трябва да се контролира времето за смилане.
Т75 колба за клетъчна култура
Трипсинът принадлежи към различен клас трипсин, който може да разгражда протеини на клетъчни мембрани, слети в колби с клетъчни култури. Чрез разтваряне на протеина в съответната част, протеинът на кръстовището между протеините се разтваря и клетката става сферична поради опорната сила на клетъчната рамка на собствената си вътрешна структура, като по този начин разделя клетките. Нивото на храносмилане на трипсин е ключов фактор при оформянето на клетките: прекомерното храносмилане увеличава клетъчните остатъци, черните остатъци се увеличават, клетките ще паднат като цяло, сериозно застрашавайки клетъчната жизнеспособност, а някои клетки плават, с изхвърления трипсин Изтичане; ако смилането не е достатъчно, за клетките е трудно да бъдат издухани от вътрешната стена на бутилката, а непрекъснатото издухване и биене също ще увреди клетъчната активност.
колба за клетъчна култура
Бутилка с разтвор на серумна протеинова култура
В различни институции или клетки ефектът на панкреатичните ензими не е еднакъв. Активността на диспергираните клетки на панкреатичния ензим също е свързана със стойността на концентрацията, температурата и продължителността на ефекта. Когато pH е 8.{1}} и температурата е 37, нивото на ефикасност на водния разтвор на панкреатичния ензим е сравнително високо. Когато се прилага трипсин, концентрацията, температурата и продължителността трябва да бъдат добре контролирани, за да се предотврати увреждане на клетките, причинено от прекомерно храносмилане. Тъй като Ca2, Mg2 и серумният протеин, протеиновите грамове намаляват активността на панкреатин, така че когато приготвяте воден разтвор на панкреатин, използвайте BSS без Ca2, Mg2, като: разтвор на D-Hanks. При спиране на храносмилането, трипсинът може да бъде спрян със среда за култивиране на серумни протеини или трипсин ретардер, за да се спре ефектът на трипсин върху клетките.
културална колба
Т25 колба за клетъчна култура
Освен това, ако това е новозакупена клетка, можете да използвате по-ниска концентрация на трипсин, за да изследвате първо времето за храносмилане и да наблюдавате дали клетките стават кръгли всяка минута и да направите добър запис. Като цяло, когато се получават клетките в колбата за клетъчна култура, е необходимо да се контролира времето за трипсинизация, така че ефективно да се поддържа жизнеспособността на клетките.