Приложение на серумна бутилка
Серумната бутилка е изработена от боросиликатно стъкло с ниска екстракция, а безцветната прозрачна бутилка отговаря на изискванията на USP тип I и ASTM E 438 тип I стандартен клас A. Може да се автоклавира при 121 градуса за 20 минути и може да се раздели на 125 ml , 250мл, 500мл, 1л, 2л според обема.
Серумната бутилка е контейнер за съхранение на серум, който обикновено е направен от PET материал чрез инжекционен процес на разтягане. Средата е хранителното вещество, необходимо за клетъчния растеж. Според източника си той се разделя на синтетична среда и естествена среда, като и двете могат да се съхраняват в бутилки със серум.
Серумна бутилка
Естествена среда:
Най-често използваната естествена среда е серумът, основно телешки серум. Серумът съдържа различни клетъчни растежни фактори, фактори, стимулиращи адхезията и техните мултиактивни вещества. В комбинация със синтетична среда, клетките могат да се размножават и растат гладко. Серумът трябва да се съхранява в специални бутилки със серум при -5 градуса до -20 градуса.
Синтетична среда:
Синтетичната среда е строго формулирана според вида и количеството вещества, необходими на клетките. Има много видове и известни компоненти, което улеснява контрола на експерименталните условия. Съдържа въглехидрати, аминокиселини, липиди, неорганични соли, витамини, микроелементи и клетъчни растежни фактори. Въпреки това, в сравнение с естествената среда, някои естествени неизвестни компоненти не могат да бъдат заменени с известни химически компоненти. Следователно, основната синтетична среда, използвана в клетъчната култура, трябва също да добави определено количество компоненти на естествената среда, за да преодолее синтетичната култура. Недостатъчна база, най-честата практика е добавянето на телешки серум.
Формата на бутилката със серум е квадратна, лесна за хващане, устойчива на повечето киселинна и алкална корозия, температурата на крехкост е -70 градуса и все още има известна якост при -30 градуса. Това е добър контейнер за опаковане, независимо дали е естествена среда или синтетична култура. може да се съхранява в бутилки със серум.
За изолиране, култивиране и идентифициране на ендотелни прогениторни клетки от кръв от пъпна връв и създаване на ацелуларни съдови скелета чрез подобрен метод за замразяване-размразяване
Да се проучи приложимостта и стойността на клиничното приложение на ендотелни прогениторни клетки, изолирани и култивирани от човешка кръв от пъпна връв.
Методи: Кръвта от пъпната връв на фетусите, подложени на цезарово сечение досрочно в Отделението по акушерство и гинекология, Първа свързана болница на Медицински колеж Бенгбу беше събрана, поставена в серумна бутилка, съдържаща 50U/ml хепарин при асептични условия, съхранявани в 4 градуса ледена кутия и транспортирани до клетки В стаята за култура, мононуклеарните клетки от кръв от пъпна връв бяха получени чрез центрофугиране с градиент на плътност. Получените мононуклеарни клетки се разделят на две части и се добавят фетална телешка серумна среда M199 (FCS-M199) и автоложна серумна среда M199 (AS-M199). И те бяха засяти в блюда за култура със и без човешки фибронектин (HFN) (маркирани като: F(0), F(1), A(0), A(1)) съответно. Извършени са ин витро индукция, диференциация и експанзия.
Наблюдавани са морфологичните промени на прилепналите клетки по време на целия процес на индукция и диференциация и те са идентифицирани от различни ъгли, комбинирани със свързани техники като имунохистохимия, имунофлуоресценция и поточна цитометрия.
Резултати: След 12 дни култивиране мононуклеарните клетки на кръвта от пъпна връв започнаха да се слепват. След 3d, формата на вретено започва да се появява, а след това броят на прилепналите клетки постепенно се увеличава и постепенно става вретеновидна. При култивиране до една седмица се образува типична колония с вретеновидни клетки около и кръгли клетки в центъра. Когато клетките се култивират в продължение на 14 дни, взаимосвързаните клетъчни клъстери постепенно се свързват и образуват структура, подобна на мрежа. В същото време, с непрекъснатото увеличаване на времето за култивиране, дългите вретеновидни клетки също започнаха постепенно да се скъсяват и показаха типична промяна, подобна на павета.
Прилепналите клетки се култивират в продължение на една седмица и се наблюдава, че броят на клетките в средата с човешки фибронектин е значително по-висок от този без човешки фибронектин и няма значителна промяна в броя на клетките в двете различни среди. #Инструментални консумативи#

